개요 Immunodiagnosis

1. 기본 개념

(1) 항체 (Ab) 항원 (Ag)

항체: 그것은 보호 단백질 의해 생성되는 인해 항원 자극, 의해 이펙터 B 세포 척추 나눌 수있는 IgG, IgM, IgA, igD, IgE. Igg는 isotype 최고 내용 혈청과 체액 회계 75% 80%. IgG 기본 항체 생산 보조 면역 반응 "메인 포스" 몸의 안티 감염을 가장 사용 항체 immunodiagnosis.

항원: 그것은 물질 일으킬 생산 항체의 모든 물질 유도할 수 면역 응답. 항원은 외국 고분자, 특정. 특수성 항원 의미합니다 항원 만 바인딩 해당 항체 또는 이펙터 T 셀, 화학 그룹 결정할 수 분자의 표면 불리는 항원 결정. 분자량 항원 일반적으로> 10kDa, 큰 분자량, 강한 antigenicity.

(2) Polyclonal 항체를 단일 클론항체

Polyclonal 항체: 항원 분자 종종 포함 다양한 항원 epitopes, 자극 면역 시스템 이 항원 활성화 다양한 B 셀 클론 동시에 시간 결과 항체 포함됩니다 다양한 항체를 다른 epitopes, 그래서 그들은 항체를.

The 단일 클론항체 매우 균질 항체 생산 단일 B 셀 클론 만 대상 특정 에피토프. 일반적으로 사용하여 준비된 하이브리도마. 이펙터 B 세포와 골수종 셀 융합됩니다 형성하는 B 셀 hybridomas. A 단일 클론 항체는 생성할 culturing 단일 하이브리도마 휴대 인구 세포의 특정 대한 에피토프. 친화력은 특이성을 단일 클론항체 일반적으로 더 그 항체를.

(3) 재조합형 항체를 재조합형 항원

재조합형 항체: A 유전자 항체는 항체 생산 생체외 사용하여 유전자 재조합 기술 단백질 공학. 얻을 유전자 순서를 항체, 구성하는 표현 벡터 전송합니다 인 표현 호스트 (효모 곤충 세포 포유류 세포 또는 박테리아). 이렇게하면 생산 항체는 freed 에서 제약 면역 시스템. 동시에 두 전장 항체의 다양한 항체 조각 생산.

재조합형 항원: 일반적으로 재조합형 항원 참조 재조합형 단백질 에센스 또한 단백질 생산 생체외 유전자 재조합 기술 단백질 공학.

2. 원칙을 immunodiagnosis

(1) 방법 더블 monoclonal 항체 샌드위치

더블 monoclonal 항체 샌드위치 방법: 사용 고체상 캐리어 코트 한 항체와 레이블 다른 표시 항체 감지 항원 수 테스트 다음 양식 복잡한 코팅 Ab Ag 표지 Ab. 이 방법은 주로 감지 항원 물질.

이미지 신용: https://www.rockland.com/resources/elisa-technique/

(2) 간접적인 방법

간접적인 방법: 탐지 방법 고체 상 캐리어 사용 고정시킵니다 항원 및 라벨 보조 항체. 이 방법은 주로 감지 IgG 항체의 샘플. 복잡한 입히는 Ag 타겟 Ab 표지 보조 Ab 형성 감지 항체의.

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(3) 캡처 방법

캡처 방법: 탐지 방법 고체 상 캐리어 사용 코트 이차 항체 다른 스트레인 의 표시 항원 감지 항체. 복잡한 입히는 보조 Ab 타겟 Ab 표지 Ag 형성되고 테스트. 이 방법은 주로 감지 IgM 수.

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(4) 경쟁 방법

경쟁 방법: 면역화학적검정입니다 입히는/표시 항체를 레테르를/코팅 항원 및 테스트 항원. 이 방법은 주로 감지 작은 분자 항원.

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방법 1: 코트 항체 on 솔리드 단계 라벨 항원, 샘플, 항원 시험 경쟁 용 항체 결합자리에 세척, 출력 결과

방법 2: 코트 항원 on 솔리드 단계 라벨 항체

3. 개발 immunodiagnosis

Immunodiagnosis 적용 면역학 이론, 기술 의미 진단 각종 질병의 결정 면역 상태. 기술 개발, immunodiagnosis 겪었습니다 immunoelectrophoresis 강수량과 교착 분석실험, radioimmunoassay, 면역, 효소 immunosorbent 분석실험, immunoturbidimetry 콜로이드 금 형광 microsphere 라벨링 블로 팅 멤브레인 스트립, chemiluminescence 단백질 칩, microfluidics 제어 기술과 단일 분자 감지.

(1) 효소 immunosorbent 분석실험 (ELISA)

효소 immunosorbent 분석실험 (ELISA) 는 검출 방법 결합한 면역 반응 원리 함께 고정 기술과 효소 라벨. 첫째, a 폴리스티렌 멀티 잘 플레이트 코트 항원/항체를 바인딩 시험 물질 수 추가 와사비 과산화 (HRP) 알칼리성 포스파타제 (AP) 세척 라벨 항체/항원 형성하기 면역 복잡한. 다음 추가 효소 chromogenic 기판 정지 솔루션을 종료 반응. 마지막으로 질적으로 또는 정량적으로 결정하는 샘플 내용 분석 의해 컬러 OD.

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이미지 신용: https://www.biotekchina.com.cn/응용 프로그램/elisa-and-related-immunoassays.html

(2) 콜로이드 골드/형광 immunochromatography

콜로이드 골드: 참조 골드 sol 분산 단계 입자 직경 1 150 nm, 및 색상 오렌지-레드 퍼플 레드.

콜로이드 골드 immunochromatography: 감지 기술을 사용하는 콜로이드 골드 표식 항체, 사용 니트로셀룰로오스 막 (NC 멤브레인) 고체상 캐리어 코트 항원/항체를 사용하고 모세관 액션 NC 막 크로마토 액체 한쪽 끝에서 막 다른, 동시에 면역 반응을 발생합니다 동안 chromatography.

형광 immunochromatography: immunochromatographic 감지 기술 바꿉니다 the 콜로이드 금을 형광 microsphere 라벨.

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이미지 신용: https://www.researchgate.net/figure/A-The-composition-of-colloidal-gold-test-strip-B-Principle-of-the-CG-test-strip_fig5_340176469

(3) Chemiluminescence 면역

Chemiluminescence: 방출 빛 수반되는 프로세스 화학 반응.

Chemiluminescence immunoassay 방법: 탐지 기술을 사용하는 멀티 웰 플레이트 또는 자기 입자를 솔리드 캐리어 코트 항원/항체, 추가 분석 및 luminophore 상표 항원/항체 형성하기 면역 복잡한 세척 후 화학적으로 자극 복잡한 또는 기판 빛을 방출한다 결정합니다 내용을 분석 의해 발광 강도.

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